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大鼠Elisa試劑盒

簡要描述:

大(da)鼠Elisa試劑盒(he)標(biao)(biao)本要(yao)求 1.標(biao)(biao)本采集后盡早進行(xing)(xing)提取,提取按相關文(wen)獻進行(xing)(xing),提取后應(ying)盡快進行(xing)(xing)實驗(yan)(yan)。若(ruo)不能馬上進行(xing)(xing)試驗(yan)(yan),可(ke)將標(biao)(biao)本放于-20℃保存(cun),但應(ying)避免(mian)反復(fu)凍融2.不能檢測(ce)含NaN3的樣(yang)品,因NaN3抑制辣根過氧化(hua)物酶(mei)的(HRP)活(huo)性。

更新時間(jian):2016-07-28

大鼠Elisa試劑盒操作步驟

1. 標(biao)準品(pin)的稀釋:本試(shi)劑(ji)盒提供原倍標(biao)準品(pin)一(yi)支,用(yong)戶(hu)可按照下列圖表(biao)在小試(shi)管(guan)中進(jin)行稀釋。

 

480μg/L

5號標準品

150μl的原倍標準品加入150μl標準品稀釋液

240μg/L

4號標準品

150μl5號標準品加入150μl標準品稀釋液

120μg/L

3號標準品

150μl4號標準品加入150μl標準品稀釋液

60μg/L

2號標準品

150μl3號標準品加入150μl標準品稀釋液

30μg/L

1號標準品

150μl2號標準品加入150μl標準品稀釋液

 

2. 加(jia)樣:分(fen)別設(she)空(kong)白孔(空(kong)白對照孔不加(jia)樣品(pin)及(ji)酶標試劑,其余各步操作相(xiang)同)、標準孔、待(dai)測(ce)樣品孔(kong)。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品zui終稀釋度為5倍)。加(jia)樣將樣品加(jia)于酶(mei)標(biao)板孔底部,盡(jin)量不觸(chu)及(ji)孔壁,輕輕晃動混勻

3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。   

4. 配液:將20倍濃縮洗滌液用蒸餾水20倍稀釋后備用

5. 洗滌(di):小心揭(jie)掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。

6. 加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。 

7. 溫育:操作同3

8. 洗滌:操作同5

9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分(fen)鐘(zhong).

10. 終止(zhi):每(mei)孔加終止(zhi)50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)

11. 測(ce)定:以空(kong)白空(kong)調零,450nm波長依序測量各孔的吸(xi)光(guang)度(OD值) 測定(ding)應(ying)在加(jia)終(zhong)止

大鼠Elisa試劑盒計算

 以標準物的濃度為橫坐標,OD值為縱坐標,在坐標紙上繪出標準曲線,根據樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度;再乘以稀釋倍數;或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀(xi)釋(shi)倍數,即(ji)為(wei)樣品的(de)實際濃度(du)。 

 注意事項

1.試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。

2濃洗滌液可能會有結晶析出,稀釋(shi)時可(ke)在水浴(yu)中加溫助溶,洗滌時不(bu)影響結果。

3.各步加樣均應使用加樣器,并經常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5分鐘內,如標本數量多,推薦使用排槍加樣。

4. 請每次測定的同時做標準曲線,做復孔。如標本中待測物質含量過高(樣本OD值大于標準品孔*孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(n倍)后再測定,計算時請zui后乘以總稀釋(shi)倍數(×n×5)。

5. 封板膜只限一次(ci)性使用,以(yi)避免(mian)交叉污(wu)染。

6.底物請避光保存。

7.嚴格按照說明書的操作進行,試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準.

8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。

9.本試劑不同批號組分不得混用。

10. 如與英文說明書有異,以英文說明書為準。

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