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人Elisa試劑盒

簡要描述：

人Elisa試劑盒計算 以標(biao)準(zhun)(zhun)物的(de)(de)(de)濃(nong)(nong)度為橫坐標(biao)，OD值為縱坐標(biao)，在(zai)坐標(biao)紙上(shang)繪(hui)出(chu)(chu)標(biao)準(zhun)(zhun)曲線，根據樣(yang)品(pin)的(de)(de)(de)OD值由標(biao)準(zhun)(zhun)曲線查出(chu)(chu)相(xiang)應的(de)(de)(de)濃(nong)(nong)度；再乘以稀釋倍數；或用標(biao)準(zhun)(zhun)物的(de)(de)(de)濃(nong)(nong)度與(yu)OD值計算出(chu)(chu)標(biao)準(zhun)(zhun)曲線的(de)(de)(de)直線回歸方(fang)程(cheng)式，將樣(yang)品(pin)的(de)(de)(de)OD值代入方(fang)程(cheng)式，計算出(chu)(chu)樣(yang)品(pin)濃(nong)(nong)度，再乘以稀釋倍數，即為樣(yang)品(pin)的(de)(de)(de)實際濃(nong)(nong)度。

更新時間：2016-07-28

人Elisa試劑盒標本(ben)要求 

1．標本采集后盡早進行提取，提取按相關文獻進行，提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗，可將標本(ben)放于-20℃保(bao)存，但(dan)應避免反復凍融

2．不能檢測(ce)含(han)NaN3的樣(yang)品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。

人Elisa試劑盒操(cao)作步(bu)驟

1. 標準品的稀釋(shi)：本試劑(ji)盒提供原倍標準品一(yi)支，用戶可按照下列圖表在小試管中(zhong)進行稀釋(shi)。

 

480μg/L

5號標準品

150μl的原倍標準品加入150μl標準品稀釋液

240μg/L

4號標準品

150μl的5號標準品加入150μl標準品稀釋液

120μg/L

3號標準品

150μl的4號標準品加入150μl標準品稀釋液

60μg/L

2號標準品

150μl的3號標準品加入150μl標準品稀釋液

30μg/L

1號標準品

150μl的2號標準品加入150μl標準品稀釋液

 

2. 加(jia)樣(yang)(yang)：分別(bie)設(she)空白孔（空白對照孔不加(jia)樣(yang)(yang)品及酶標(biao)試(shi)劑，其余各步操(cao)作(zuo)相同）、標(biao)準孔、待測(ce)樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl，待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品zui終稀釋度為5倍）。加(jia)(jia)樣將樣品加(jia)(jia)于酶標(biao)板孔底部，盡量(liang)不觸及孔壁，輕輕晃動混(hun)勻。

3. 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育(yu)30分鐘。   

4. 配液：將20倍濃縮洗滌液用蒸餾水20倍稀釋后備用

5. 洗滌：小心揭掉封板(ban)膜，棄(qi)去液體，甩(shuai)干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復5次，拍干。

6. 加酶：每孔加入酶標試劑50μl，空白孔除外。 

7. 溫育：操作同3。

8. 洗滌：操作同5。

9. 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯(xian)色(se)15分鐘(zhong).

10. 終止：每孔加終止液50μl，終止反應（此時藍(lan)色(se)立轉黃色(se)）。

11. 測(ce)定：以空(kong)白空(kong)調零(ling)，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。 測定應在(zai)加終止

計算(suan)

 以標準物的濃度為橫坐標，OD值為縱坐標，在坐標紙上繪出標準曲線，根據樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度；再乘以稀(xi)釋倍數；或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD值代入方程式，計算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數，即為樣(yang)品的實際濃(nong)度。 

 注意事項

1．試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標包被板開封后如未用完，板條應裝入密封袋中保存。

2．濃洗(xi)滌(di)液(ye)可能會有結(jie)晶(jing)析出，稀釋時(shi)可在水浴中加溫助(zhu)溶，洗(xi)滌時(shi)不影響結果。

3．各步加樣均應使用加樣器，并經常校對其準確性，以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5分鐘內，如標本數量多，推薦使用排槍加樣。

4． 請每次測定的同時做標準曲線，做復孔。如標本中待測物質含量過高（樣本OD值大于標準品孔*孔的OD值），請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數（n倍）后再測定，計算時請zui后乘以總(zong)稀釋倍(bei)數（×n×5）。

5． 封板(ban)膜(mo)只限一(yi)次性(xing)使用，以(yi)避免交叉污(wu)染。

6．底物請避光保存。

7．嚴格按照說明書的操作進行，試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準.

8．所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。

9．本試劑不同批號組分不得混用。

10. 如與英文說明書有異，以英文說明書為準。

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