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豚鼠過氧化脂質/乳過氧化物酶（LPO）ELISA試劑盒

簡要描述：

豚鼠過氧化脂質/乳過氧化物酶(LPO)ELISA試劑盒
使用目的：
為定量(性)測定活化的目標濃度的血清，血漿，組織勻漿，細胞培養上清及其他生物液體。研究使用不是用于診斷或治療程序。
如(ru)果你(ni)有(you)任(ren)何問題，請上海(hai)義森生物科技(ji)有(you)限公司。

更(geng)新時(shi)間：2016-01-20

豚鼠過氧化脂質/乳過氧化物酶（LPO）ELISA試劑盒 

試劑盒組成

1

20倍濃縮洗滌液

20ml×1瓶

7

終止液

3ml×1瓶

2

酶標試劑(ji)

3ml×1瓶

8

標(biao)準品（960μg/L）

0.5ml×1瓶

3

酶標包被板

12孔×4條

9

標準品稀釋液

1.5ml×1瓶

4

樣品稀釋液

3ml×1瓶

10

說明書(shu)

1份

5

顯色劑A液

3ml×1瓶

11

封(feng)板膜

2張  

6

顯色劑B液

3ml×1/瓶

12

密封(feng)袋(dai)

1個

標本要求(qiu) 

1．標本采集后盡早進行提取，提取按相關文獻進行，提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗，可將標本放于-20℃保存，但應避(bi)免反(fan)復凍融

2．不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。

操作步驟

1. 標(biao)準(zhun)(zhun)品的(de)稀釋：本試劑盒(he)提供原倍標(biao)準(zhun)(zhun)品一(yi)支(zhi)，用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。

480μg/L

5號標準品

150μl的原倍標準品加入150μl標準品稀釋液

240μg/L

4號標準品

150μl的5號標準品加入150μl標準品稀釋液

120μg/L

3號標準品

150μl的4號標準品加入150μl標準品稀釋液

60μg/L

2號標準品

150μl的3號標準品加入150μl標準品稀釋液

30μg/L

1號標準品

150μl的2號標準品加入150μl標準品稀釋液

2. 加樣：分別設(she)空白(bai)孔(kong)（空白(bai)對照孔(kong)不加樣品及酶(mei)標試劑，其余各步操作相同(tong)）、標準孔(kong)、待測樣(yang)品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl，待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品zui終稀釋度為5倍）。加(jia)樣將(jiang)樣品加(jia)于酶標板孔底部，盡量(liang)不(bu)觸(chu)及孔壁(bi)，輕輕晃(huang)動混勻(yun)。

3. 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘(zhong)。   

4. 配液：將20倍濃縮洗滌液用蒸餾水20倍稀釋后備用

5. 洗(xi)滌：小(xiao)心揭(jie)掉封板膜(mo)，棄去液體，甩(shuai)干(gan)，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復5次，拍干。

6. 加酶：每孔加入酶標試劑50μl，空白孔除外。 

7. 溫育：操作同3。

8. 洗滌：操作同5。

9. 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避(bi)光顯色15分鐘(zhong).

10. 終止：每孔加終止液50μl，終止反應（此(ci)時(shi)藍(lan)色(se)立轉黃色(se)）。

11. 測(ce)定：以空白空調零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。 測定應在加終止

豚鼠過氧化脂質/乳過氧化物酶（LPO）ELISA試劑盒

計算

 以標準物的濃度為橫坐標，OD值為縱坐標，在坐標紙上繪出標準曲線，根據樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度；再乘以稀釋倍數；或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD值代入方程式，計算出樣品濃度，再乘以稀釋倍(bei)數，即(ji)為樣品(pin)的實際(ji)濃(nong)度。 

 注意事項(xiang)

1．試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標包被板開封后如未用完，板條應裝入密封袋中保存。

2．濃洗滌液可能會有結晶析出，稀釋(shi)時可在水浴中加溫助(zhu)溶，洗滌時不(bu)影響(xiang)結果。

3．各步加樣均應使用加樣器，并經常校對其準確性，以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5分鐘內，如標本數量多，推薦使用排槍加樣。

4． 請每次測定的同時做標準曲線，做復孔。如標本中待測物質含量過高（樣本OD值大于標準品孔*孔的OD值），請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數（n倍）后再測定，計算時請zui后乘(cheng)以總稀釋倍數（×n×5）。

5． 封(feng)板膜只限一次性使用，以避免交(jiao)叉污染(ran)。

6．底物請避光保存。

7．嚴格按照說明書的操作進行，試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準.

8．所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。

9．本試劑不同批號組分不得混用。

10. 如與英文說明書有異，以英文說明書為準。

保存條件及有效期

1．試劑盒保(bao)存：；2-8℃。

2．有效期：6個月

 

 

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