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倉鼠組織蛋白酶K（cath-K）ELISA試劑盒

簡要描述：

倉鼠組織蛋白酶K(cath-K)ELISA試劑盒
使用目的：
為定量(性)測定活化的目標濃度的血清，血漿，組織勻漿，細胞培養上清及其他生物液體。研究使用不是用于診斷或治療程序。
如果你有(you)任(ren)何問題，請上(shang)海義森生(sheng)物科(ke)技有(you)限(xian)公(gong)司。

更新時間：2016-01-18

倉鼠組織蛋白酶K（cath-K）ELISA試劑盒

試劑盒組(zu)成(cheng)

1

20倍濃縮洗滌液

20ml×1瓶

7

終止(zhi)液

3ml×1瓶

2

酶標試劑

3ml×1瓶

8

標準品（960μg/L）

0.5ml×1瓶

3

酶標包被板

12孔×4條

9

標(biao)準(zhun)品稀釋(shi)液

1.5ml×1瓶

4

樣品稀釋液

3ml×1瓶

10

說(shuo)明書

1份

5

顯色劑A液

3ml×1瓶

11

封(feng)板膜

2張  

6

顯色劑B液

3ml×1/瓶

12

密封袋

1個

標本要求 

1．標本采集后盡早進行提取，提取按相關文獻進行，提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗，可將標本放于-20℃保存(cun)，但(dan)應避免(mian)反(fan)復凍融

2．不能(neng)檢(jian)測含NaN3的(de)樣(yang)品(pin)，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。

操作步(bu)驟

1. 標準(zhun)品(pin)的稀(xi)釋：本試劑盒提(ti)供原倍標準(zhun)品(pin)一支，用戶(hu)可按照下列圖表在小試管中進行稀(xi)釋。

480μg/L

5號標準品

150μl的原倍標準品加入150μl標準品稀釋液

240μg/L

4號標準品

150μl的5號標準品加入150μl標準品稀釋液

120μg/L

3號標準品

150μl的4號標準品加入150μl標準品稀釋液

60μg/L

2號標準品

150μl的3號標準品加入150μl標準品稀釋液

30μg/L

1號標準品

150μl的2號標準品加入150μl標準品稀釋液

2. 加樣(yang)(yang)：分別設空白(bai)孔(kong)（空白(bai)對照孔(kong)不加樣(yang)(yang)品及(ji)酶(mei)標試(shi)劑，其余各(ge)步操(cao)作相同）、標準(zhun)孔(kong)、待測(ce)樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl，待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品zui終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標板孔底(di)部，盡量(liang)不觸(chu)及孔壁，輕輕晃動混勻。

3. 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘(zhong)。   

4. 配液：將20倍濃縮洗滌液用蒸餾水20倍稀釋后備用

5. 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液(ye)體(ti)，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復5次，拍干。

6. 加酶：每孔加入酶標試劑50μl，空白孔除外。 

7. 溫育：操作同3。

8. 洗滌：操作同5。

9. 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯(xian)色15分鐘(zhong).

10. 終止：每孔加終止液50μl，終止反應（此時藍色立轉黃色）。

11. 測定：以(yi)空白(bai)空調零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。 測定(ding)應在加終(zhong)止

倉鼠組織蛋白酶K（cath-K）ELISA試劑盒

計(ji)算(suan)

 以標準物的濃度為橫坐標，OD值為縱坐標，在坐標紙上繪出標準曲線，根據樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度；再乘以稀釋倍(bei)數；或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD值代入方程式，計算出樣品濃度，再乘以稀(xi)釋倍(bei)數(shu)，即為樣(yang)品的實際濃度。 

 注意事項

1．試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標包被板開封后如未用完，板條應裝入密封袋中保存。

2．濃洗滌(di)液(ye)可能會有(you)結(jie)晶析出(chu)，稀釋時可在水浴中加(jia)溫助溶，洗滌時不影響結(jie)果。

3．各步加樣均應使用加樣器，并經常校對其準確性，以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5分鐘內，如標本數量多，推薦使用排槍加樣。

4． 請每次測定的同時做標準曲線，做復孔。如標本中待測物質含量過高（樣本OD值大于標準品孔*孔的OD值），請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數（n倍）后再測定，計算時請zui后乘以總(zong)稀釋倍(bei)數（×n×5）。

5． 封(feng)板膜只限一次性使(shi)用，以避免交叉污染。

6．底物請避光保存。

7．嚴格按照說明書的操作進行，試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準.

8．所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。

9．本試劑不同批號組分不得混用。

10. 如與英文說明書有異，以英文說明書為準。

保(bao)存條件及有(you)效期

1．試(shi)劑盒保存：；2-8℃。

2．有效期：6個月

 

 

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