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倉鼠明膠酶B（Gelatinase B)ELISA試劑盒 使用目的： 為定量(性)測定活化的目標濃度的血清，血漿，組織勻漿，細胞培養上清及其他生物液體。研究使用不是用于診斷或治療程序。 如果你(ni)有任(ren)何問題，請上海義森生物科(ke)技有限(xian)公司。
更新時間：2016-01-18
倉鼠明膠酶B（Gelatinase B）ELISA試劑盒
試劑盒組成
| 1 | 20倍濃縮洗滌液 | 20ml×1瓶 | 7 | 終止液 | 3ml×1瓶 |
| 2 | 酶(mei)標試劑 | 3ml×1瓶 | 8 | 標準品（960μg/L） | 0.5ml×1瓶 |
| 3 | 酶(mei)標包被板 | 12孔×4條 | 9 | 標(biao)準(zhun)品稀(xi)釋液 | 1.5ml×1瓶 |
| 4 | 樣品稀釋液 | 3ml×1瓶 | 10 | 說(shuo)明書 | 1份 |
| 5 | 顯色劑A液 | 3ml×1瓶 | 11 | 封板膜 | 2張 |
| 6 | 顯色劑B液 | 3ml×1/瓶 | 12 | 密(mi)封袋(dai) | 1個 |
標(biao)本要求
1．標本采集后盡早進行提取，提取按相關文獻進行，提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗，可將標(biao)本放于-20℃保存，但應避免反復凍融
2．不能檢測含(han)NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。
操作步驟
1. 標(biao)準(zhun)品(pin)的稀(xi)釋(shi)：本(ben)試劑盒提供原倍標(biao)準(zhun)品(pin)一支(zhi)，用戶可(ke)按照下列圖表在小(xiao)試管(guan)中(zhong)進行(xing)稀(xi)釋(shi)。
| 480μg/L | 5號標準品 | 150μl的原倍標準品加入150μl標準品稀釋液 |
| 240μg/L | 4號標準品 | 150μl的5號標準品加入150μl標準品稀釋液 |
| 120μg/L | 3號標準品 | 150μl的4號標準品加入150μl標準品稀釋液 |
| 60μg/L | 2號標準品 | 150μl的3號標準品加入150μl標準品稀釋液 |
| 30μg/L | 1號標準品 | 150μl的2號標準品加入150μl標準品稀釋液 |
2. 加樣(yang)：分別(bie)設空白(bai)孔（空白(bai)對照孔不加樣(yang)品及酶標試劑，其余各(ge)步操作相同(tong)）、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl，待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品zui終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標板孔底(di)部，盡量(liang)不觸(chu)及孔壁，輕(qing)輕(qing)晃動(dong)混勻。
3. 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分(fen)鐘。
4. 配液：將20倍濃縮洗滌液用蒸餾水20倍稀釋后備用
5. 洗滌：小(xiao)心揭掉封(feng)板膜，棄去液(ye)體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復5次，拍干。
6. 加酶：每孔加入酶標試劑50μl，空白孔除外。
7. 溫育：操作同3。
8. 洗滌：操作同5。
9. 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色(se)15分(fen)鐘.
10. 終止(zhi)：每孔加終止(zhi)液50μl，終止反應（此(ci)時藍色(se)立轉黃色(se)）。
11. 測定：以空(kong)白(bai)空(kong)調零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。 測定(ding)應(ying)在加終止
倉鼠明膠酶B（Gelatinase B）ELISA試劑盒
計算
以標準物的濃度為橫坐標，OD值為縱坐標，在坐標紙上繪出標準曲線，根據樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度；再乘以稀釋(shi)倍數；或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD值代入方程式，計算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數，即為(wei)樣(yang)品(pin)的實(shi)際濃度。
注意(yi)事項(xiang)
1．試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標包被板開封后如未用完，板條應裝入密封袋中保存。
2．濃洗滌液(ye)可能會(hui)有(you)結晶(jing)析出，稀釋時可在水浴中加(jia)溫助溶，洗(xi)滌(di)時不影響結果。
3．各步加樣均應使用加樣器，并經常校對其準確性，以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5分鐘內，如標本數量多，推薦使用排槍加樣。
4． 請每次測定的同時做標準曲線，做復孔。如標本中待測物質含量過高（樣本OD值大于標準品孔*孔的OD值），請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數（n倍）后再測定，計算時請zui后乘以(yi)總稀釋倍數（×n×5）。
5． 封板膜(mo)只限一次(ci)性(xing)使(shi)用，以避免交叉污染(ran)。
6．底物請避光保存。
7．嚴格按照說明書的操作進行，試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準.
8．所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。
9．本試劑不同批號組分不得混用。
10. 如與英文說明書有異，以英文說明書為準。
保存(cun)條件及(ji)有效期
1．試劑盒保存(cun)：；2-8℃。
2．有效期：6個月
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